绿色荧光蛋白标记人脂肪基质细胞成骨分化能力体外实验研究

• 作者: 严征斌 乔鞠 吴凌 敬伟 李志勇 林云锋 田卫东 陈希哲
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 人脂肪基质细胞 绿色荧光蛋白 基因转染 分化
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 700-703
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3443字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2006.05.010

摘要

目的 研究绿色荧光蛋白(GFP)基因体外转染人脂肪基质细胞的方法,并检测基因转染后细胞的生物学特性及分化潜能.方法 体外分离培养人脂肪基质细胞,用重组腺病毒载体Ad-GFP及脂质体介导质粒pEGFP-C1两种方法转染GFP基因,通过流式细胞术观察比较GFP转染和表达的结果;倒置显微镜下观察细胞生长情况;将腺病毒介导的基因转染细胞经成骨定向诱导后,检测碱性磷酸酶表达和钙结节形成情况. 结果 重组GFP基因的腺病毒Ad-GFP转染的脂肪基质细胞的感染率达(42.5±1.5)%,16 h即有GFP表达,7 d时表达趋于稳定,感染6周时仍可见有GFP表达,明显优于脂质体转染组(转染效率最高为11.4%).感染Ad-GFP后的脂肪基质细胞与未感染的对照组脂肪基质细胞成骨诱导分化后碱性磷酸酶(ALP)表达均逐渐增高,两组间差异无统计学意义(P>0.05);诱导21 d后两组均见到茜素红钙盐染色阳性.结论 重组GFP基因的腺病毒载体Ad-GFP可高效率感染脂肪基质细胞,基因转染后细胞的增殖分化能力未受到影响,可以作为一种高效可靠的人脂肪基质细胞标记方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	乔鞠	四川大学华西口腔医院颌面外科	13	97	6.0	9.0
2	陈希哲	四川大学华西口腔医院颌面外科	14	97	7.0	9.0
3	林云锋	四川大学华西口腔医院颌面外科	15	109	5.0	10.0
4	李志勇	四川大学华西口腔医院颌面外科	35	240	10.0	14.0
5	敬伟	四川大学华西口腔医院颌面外科	5	27	4.0	5.0
6	吴凌	四川大学华西口腔医院颌面外科	7	63	4.0	7.0
7	严征斌	四川大学华西口腔医院颌面外科	1	4	1.0	1.0