雄性激素不敏感综合征家系中可育与不育患者间的差异表达基因

• 作者: 叶璐夷 张荣梅 王久存 王明华 罗泽伟 罗诗静 苏城昌 赵志民
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 雄性激素不敏感综合征 生殖器皮肤成纤维细胞 抑制消减杂交 差异表达基因
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 219-224
• 页数: 6页
• 分类号: R394
• 语种: 中文

摘要

目的利用抑制消减杂交方法筛选和鉴定某雄性激素不敏感综合征家系中1名可育患者与1名不育患者间的差异表达基因.方法分别以可育患者(MJ)和不育患者(ZGJ)的生殖器皮肤成纤维细胞(GSF)为实验方,构建正向和反向消减文库.通过菌落原位杂交、点杂交、Southern印迹法逐步筛选得到候选阳性克隆,利用Northern印迹法验证,并将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析.结果构建了这两名患者GSF的正向和反向消减文库,筛选得到反向消减文库中2个Northern阳性克隆,以及两文库中11个无Northern杂交信号、可能代表低丰度转录本的候选克隆.测序和同源性分析显示2个Northern阳性克隆分别与自家趋化素(autotaxin-t)基因和钙结合蛋白S100A6基因高度同源.结论以上2个Northern阳性克隆以及11个无Northern杂交信号的克隆可能代表两患者GSF的差异表达基因,有助于阐明雄性激素不敏感综合征家系中患者表型多样性及育性保留的分子机制.