大鼠脂肪细胞中14-3-3蛋白与葡萄糖转运子4的相互作用

• 作者: 张旭 王姮
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 葡萄糖转运子4 14-3-3蛋白 免疫共沉淀
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 832-836
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2006.08.007

摘要

目的 研究在大鼠脂肪细胞中,14-3-3蛋白与葡萄糖转运子4(GLUT4)之间是否存在相互作用.方法 用胶原酶Ⅰ消化雄性SD大鼠附睾上的脂肪垫,获得分离的脂肪细胞.在纯化的细胞中,采用低渗裂解和甘油梯度速率沉降技术获得3个含有GLUT4的组分:T、H和L.用交联了1F8(GLUT4特异性单抗)的琼脂糖微珠对脂肪细胞总提取物以及上述3个组分分别进行免疫吸附实验,经吸附后在上清液和微珠的洗脱液中分别进行14-3-3蛋白和GLUT4的免疫印迹分析.结果 在脂肪细胞的总提取物以及上述GLUT4的3个组分T、H和L中,14-3-3蛋白都能够与GLUT4发生免疫共沉淀.共沉淀下来的14-3-3蛋白在免疫印迹分析时显示为2个条带,其相对分子质量分别约为29 ku和60ku,提示14-3-3蛋白可能以二聚体的形式与GLUT4发生相互作用.结论 在生理条件下,14-3-3蛋白与GLUT4在大鼠脂肪细胞中存在相互作用.