14-3-3/HIP-55复合体增强HIP-55蛋白稳定性

• 作者: 李子健 田爱炬
• 来源期刊: 北京大学学报医学版
• 关键词: HIP-55蛋白,人 14-3-3蛋白质类 蛋白质相互作用
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 893-897
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-167X.2015.06.001

摘要

目的:用双分子荧光互补及免疫共沉淀技术验证HIP-55与14-3-3在HEK293细胞中存在相互作用,并进一步研究其生物学意义. 方法:利用GATEWAY系统构建PDEST-N-Venus-HIP-55WT(野生型),PDEST-N-Venus-HIP-55AA(突变体S269A/T291A),PDEST-GST-HIP-55WT及PDEST-C-Venus-14-3-3τ重组质粒,利用双分子荧光互补及免疫共沉淀技术检测两者的相互作用,同时应用14-3-3蛋白相互作用抑制肽R18和HIP-55蛋白突变体( HIP-55AA突变体S269A/T291A不能与14-3-3相互作用)作为工具研究两者结合后对嘌呤霉素诱导的HIP-55蛋白表达的影响. 结果:外源转入的Venus-HIP-55WT、Venus-HIP-55AA及Venus-14-3-3蛋白能够在HEK293细胞中表达;双分子荧光互补实验结果表明HIP-55与14-3-3存在相互作用,HIP-55蛋白的S269/T291位点介导HIP-55与14-3-3的相互作用;免疫共沉淀技术表明内源性HIP-55与14-3-3存在相互作用;进一步研究发现HIP-55与14-3-3复合体增强HIP-55蛋白的稳定性,保护HIP-55不被降解. 结论:14-3-3与HIP-55存在相互作用,14-3-3/HIP-55复合体可以促进HIP-55蛋白的稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田爱炬		1	0	0.0	0.0
2	李子健		3	5	1.0	2.0