在活体小鼠中筛选lZP3基因RNAi有效靶位点的研究

• 作者: 庄淑珍 张富春 李菁菁 郑耀虎
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: RNA干扰 靶位点 共转染 尾静脉大容量快速注射法
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 979-983
• 页数: 5页
• 分类号: Q754
• 字数: 4189字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.06.019

摘要

ZP3作为精子结合的靶对象在卵母细胞受精中起着关键作用,也因此而成为研究哺乳动物受精机理的焦点.本研究参照新疆草原兔尾鼠卵透明带3(zona pellucida 3 gene of Lagurus lagurus, lZP3)的mRNA,选择了针对lZP3 mRNA的3个区域合成寡聚核苷酸连接到干扰载体pGenesil-1上,构建了3个针对lZP3 mRNA的重组干扰载体,和pCDNA3-lZP3表达载体采用脂质体法共转染Hela细胞以及通过尾静脉大容量快速注射法(Hydrodynamics-based transfection method, HD法)共注射小鼠,半定量RT-PCR和real-time PCR检测Hela细胞和小鼠肝脏中lZP3 mRNA的表达情况,以筛选干扰lZP3 mRNA的有效靶位点.结果表明,通过HD法共注射干扰载体和表达载体后,外源基因mRNA在小鼠肝脏中的表达和共转染Hela细胞后在Hela细胞中的表达情况是一致的,有2个干扰载体可以有效干扰lZP3 mRNA的表达.研究还说明,利用HD法以小鼠作为实验材料筛选RNA干扰的有效靶位点是一条切实可行的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张富春	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室	286	2034	23.0	31.0
2	庄淑珍	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室	7	12	2.0	3.0
3	郑耀虎	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室	4	11	2.0	3.0
4	李菁菁	新疆大学生命科学与技术学院分子生物学重点实验室新疆生物资源基因工程重点实验室	5	21	2.0	4.0