小鼠Biccl基因RNAi序列的筛选与鉴定

• 作者: 周亮 杨君兴
• 来源期刊: 动物学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 小鼠Biccl基因 RNA干扰 pRS-Hush pEGFP-C3-Bieel 转染
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 84-88
• 页数: 5页
• 分类号: Q344|Q786
• 字数: 3852字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1141.2010.01084

摘要

通过网上提供的生物信息学分析软件进行搜索和比对,初步筛选到3个较好的针对小鼠双尾-C(Biccl)基因的RNA干扰(RNAi)序列.合成这3个干涉序列片段后克隆到pRS-Hush shRNA载体中.构建Biccl基因的真核表达载体pEGFP-C3-Biccl,将绿色荧光蛋白(GFP)标签标记在Biccl蛋白上.利用细胞转染技术将pEGFP-C3-Biccl与3个干涉序列载体共转染至体外培养的HEK-293细胞中,最后通过细胞荧光强度、半定量PCR和Western blotting鉴定出其中两个序列(pRS-Hush-RNAi-Biccl-N/-C)能明显降低Biccl蛋白在HEK-293细胞中的表达水平,为下一步建立起低表达Biccl的稳定细胞株和研究小鼠Biccl的功能提供了良好的材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨君兴	中国科学院昆明动物研究所	82	916	18.0	25.0
2	周亮	中国科学院昆明动物研究所	43	294	8.0	16.0