FAK基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 毛贺辉 苏国强
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: FAK RNAi 慢病毒
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 1364-1366
• 分类号: R735.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2010.12.008

摘要

目的 构建FAK基因RNA干扰慢病毒栽体,方法选定FAK基因RNAi靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA(引物),与经Xho I和Hpa I双酶切后的慢病毒栽体pLentilox3.7(pLL3.7)连接,产生pLL3.7 FAK慢病毒载体,经Xba I和Not I酶切电泳筛选阳性克隆,测序鉴定.用PHR、pVSVG和pLL3.7 FAK慢病毒载体共转染包装细胞293T细胞.包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果 酶切和测序证实,构建出了FAK shR-NA的慢病毒栽体pLL3.7 FAK.包装慢病毒,测得离心的浓缩病毒悬液的滴度为4×107TU/ml.结论 成功构建FAK基因RNAi慢病毒栽体,为肿瘤细胞生物学行为及功能研究提供了一个有用的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	苏国强	厦门大学附属第一医院普外科	17	64	3.0	8.0
2	毛贺辉	厦门大学附属第一医院普外科	1	1	1.0	1.0