HIF-1α基因miR RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 孔佩艳 张曦 彭贤贵 曾东风 梁雪 王庆余 陈幸华 高蕾
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 缺氧诱导因子-1α(HIF-1α) RNA干扰(RNAi) 慢病毒 绿色荧光蛋白(GFP)
• 年，卷（期）: 2007,（17）
• 所属期刊栏目: 血液专题
• 页码范围: 1707-1708,1712
• 页数: 3页
• 分类号: R730.21
• 字数: 2847字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2007.17.008

摘要

目的 构建人HIF-1α的miR RNAi慢病毒载体.方法 利用已经构建成功的针对人HIF-1α基因的miRNA干扰质粒pcDNATM6.2-GW/EmGFP-HIF-1α miR,通过BP/LR反应,将EmGFP-HIF-1α-miR表达框整合重组到产毒质粒pLenti6/V5-DEST中测序鉴定,用PLP1、PLP2和PLP/VSVG质粒共转染包装293FT细胞产毒,并利用GFP蛋白表达水平进行滴度测定.结果 经测序鉴定证实成功构建针对人HIF-1α基因的miRNA慢病毒干扰载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-HIF-1α miR.结论 成功构建针对人HIF-1α基因的miRNA慢病毒RNA干扰载体.