惠阳胡须鸡Ⅱ型干扰素基因在毕赤酵母中的表达及其产物活性分析

• 作者: 史喜菊 吴志光 张灿 柏亚铎 汪明 韩春来
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 惠阳胡须鸡 Ⅱ型干扰素 毕赤酵母 表达 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 311-314
• 页数: 4页
• 分类号: S858.31
• 字数: 3493字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2006.04.013

摘要

为了确定惠阳胡须鸡IFN-γ基因(chIFN-γ2)在毕赤酵母中表达的重组蛋白的抗病毒活性和蛋白的二级结构,将pGEM-T-chIFN-γ2重组质粒中的chIFN-γ2基因克隆到表达质粒pPICZαB上,经酶切鉴定、PCR鉴定和测序后的序列同源性分析,证明目的基因没有发生缺失、突变,并且插入方向正确.将重组质粒电转化到毕赤酵母感受态细胞GS115中,阳性转化子经甲醇诱导表达,获得了高效分泌表达.重组IFN-γ的分子质量约为33 ku,表达量达0.604 mg/mL,在鸡胚成纤维细胞(CEF)上抑制VSV的抗病毒活性为3.2×104 U/mg.圆二色性分析表明,IFN-γ酵母重组蛋白属于典型的α螺旋蛋白,二级结构含量为:α螺旋55.1%,β折叠8.3%,转角13.9%,无规卷曲22.8%.采用毕赤酵母分泌表达了有活性的鸡IFN-γ,并首次证明鸡IFN-γ重组蛋白属于典型的α型蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪明	中国农业大学动物医学院	260	2264	23.0	31.0
2	吴志光	中国农业大学动物医学院	16	400	11.0	16.0
3	韩春来	中国农业大学动物医学院	16	131	6.0	11.0
7	史喜菊		1	7	1.0	1.0
8	张灿	莱阳农学院动物科技学院	2	7	1.0	2.0
9	柏亚铎		1	7	1.0	1.0