耐热菌的竞争定量PCR检测方法优化与建立

• 作者: 仇农学 冯再平 李建科
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 耐热菌 苹果浓缩汁 竞争定量PCR
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 园艺·贮藏·保鲜·加工
• 页码范围: 375-381
• 页数: 7页
• 分类号: S6
• 字数: 6885字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2006.02.023

摘要

[目的]研究苹果浓缩汁中耐热菌(Alicyclobacillus acidoterrestris)的定量PCR快速检测法.[方法]通过引物设计、PCR扩增及凝胶纯化试剂盒回收,构建并获得耐热菌的PCR竞争模板;用获得的竞争模板作为定量内标物建立耐热菌的竞争定量PCR(QC-PCR)检测体系.[结果]经对建立的QC-PCR检测体系优化,目标模板检测灵敏度由5×104个分子/PCR 体系,提高到50个分子/PCR 体系,竞争模板和目标模板分子共扩增可检测到5×102个目标模板分子/PCR 体系,并能从人工回添苹果浓缩汁样品中定量检测到5×103 cfu/ PCR体系的耐热菌,整个检测时间为4～5 h,比传统的细菌培养皿培养记数法时间(4～5 d)大大缩短.[结论]本研究建立的耐热菌竞争定量PCR检测法特异、快速,可作为微生物PCR竞争模板构建和建立竞争定量PCR的方法学参考,也可用于商品果汁和苹果浓缩汁工业化生产中耐热菌的快速检测和质量安全控制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李建科	陕西师范大学食品工程系	163	2757	30.0	44.0
2	冯再平	兰州理工大学生命科学与工程学院	17	82	5.0	8.0
3	仇农学	陕西师范大学食品工程系	161	2329	26.0	36.0