SiRNA特异性抑制cyclin D1的表达及其shRNA表达质粒的构建

• 作者: 卓建新 李继承 蒋磊 陈日曙
• 来源期刊: 实用癌症杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基础医学 cyclin D1 siRNA shRNA
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 120-122,129
• 页数: 4页
• 分类号: R73-35+1
• 字数: 3079字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5930.2006.02.003

摘要

目的研究siRNA (small interfering RNA)对cyclin D1基因表达的抑制作用及shRNA表达质粒的构建.方法化学合成针对cyclin D1基因的siRNA,转染MCF-7细胞株;分别应用荧光定量PCR和免疫印迹检测cyclin D1 mRNA和蛋白的表达;合成特异性cyclin D1的RNA干扰寡核苷酸序列,采用克隆技术,将其插人Psilencer2.1-U6质粒表达载体,构建cyclin D1 shRNA(small hairpin RNA,shRNA)表达载体.结果化学合成的siRNA转染MCF-7细胞,48 h 后cyclin D1基因和蛋白表达都明显降低;构建特异性针对cyclin D1的shRNA 表达质粒,酶切和测序结果显示,siRNA片段已成功插入Psilencer2.1-U6载体,载体构建成功.结论 siRNA可以有效抑制MCF-7细胞株中cyclin D1的表达,并成功构建其shRNA表达质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李继承	浙江大学细胞生物学研究所	156	1092	18.0	23.0
2	蒋磊	浙江大学细胞生物学研究所	7	28	2.0	5.0
3	卓建新		1	2	1.0	1.0
4	陈日曙		2	2	1.0	1.0