人巨细胞病毒pp150蛋白片段与MDBP蛋白片段的融合表达及初步应用

• 作者: 刘毅 张华宁 郭大东 韩金祥 高雪芹
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 人巨细胞病毒 融合蛋白 原核表达 Western blot 蛋白芯片
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 956-961
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4521字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.06.015

摘要

人巨细胞病毒(HCMV)感染是临床上常见的一种病毒性传播疾病,正常人群常无明显的临床症状,而对器官移植患者、免疫力低下及孕妇等人可产生严重的危害.以HCMV AD169病毒株基因为模板,经PCR扩增了编码pp150蛋白片段的UL32基因和编码MDBP蛋白片段的UL57基因,目的基因转化入pMD18-T克隆载体后再经酶切与表达载体pET-11a连接构建出融合基因表达载体,然后转入大肠杆菌BL21,重组大肠杆菌经诱导表达融合蛋白pp150/MDBP.经SDS-PAGE分析,其相对分子量约为27kD,表达量约占菌体蛋白的17.45,Western blot鉴定为阳性,ELISA及蛋白芯片检测表明融合蛋白具有良好的抗原性,经过初步应用表明其对血清IgG及IgM的检出率与全抗原相比一致,具有进一步开发应用的价值.