人巨细胞病毒pp150-gp52蛋白原核可溶性表达与IgM捕获ELISA方法建立和应用

• 作者: 侯江厚 孙卫国 孙雯娜 张灵霞 杨秉芬
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 巨细胞病毒 pp150蛋白 gp52蛋白 可溶性表达
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R373|Q503
• 字数: 3481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2015.05.001

摘要

目的 原核系统内表达并纯化巨细胞病毒pp150-gp52融合蛋白优势抗原表位,建立IgM捕获ELISA方法并应用.方法 通过重叠PCR技术扩增获得巨细胞病毒pp150-gp52优势片段核酸序列,在原核系统内可溶性表达DsbCpp150-gp52融合蛋白并纯化,用Western blot和ELISA检测融合蛋白的特异性和应用价值.结果 纯化获得的融合蛋白DsbC-pp150-gp52经酶标记建立IgM捕获ELISA方法,检测60份临床阳性血清和60份健康人血清.其中以酶标记DsbC-pp150-gp52蛋白建立的捕获ELISA法阳性检出率96.7％,阴性检出率100％,初步验证DsbC-pp150-gp52融合肽具有非常好的抗原特异性.结论 融合蛋白DsbC-pp150-gp52在大肠埃希菌中以可溶性表达形式存在,获得的高纯度重组融合蛋白具有抗原性和特异性强的特点,采用IgM捕获ELISA的实验方法,可开发检测试剂盒用于风疹病毒的早期检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙卫国		1	1	1.0	1.0
2	孙雯娜		1	1	1.0	1.0
3	侯江厚		1	1	1.0	1.0
4	杨秉芬		1	1	1.0	1.0
5	张灵霞		1	1	1.0	1.0