猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型RTX毒素I的N-端表达多肽具有良好的免疫原性

• 作者: 刘维红 卢海松 周锐 林荔雯 梅岭 洪文洲 贝为成 陈焕春
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪胸膜肺炎放线杆菌 ApxI毒素 N-端多肽 原核表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 39-45
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 字数: 6039字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2006.01.006

摘要

ApxI外毒素是猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)最重要的毒力因子,为了研究其N端多肽的免疫原性,分别将apxIA基因的全长编码区(apxIA,3146bp)及其5'端1140bp的片段(apxIA5)克隆到原核表达载体pET-28a,经IPTG诱导后在大肠杆菌中实现了表达,表达产物ApxIA和ApxIAN均以包涵体的形式存在,Westem-blot检测证实两种表达产物均具有免疫反应性.将纯化的重组蛋白(rApxIA和rApxIAN)和提取的天然毒素ApxI(nApxI)分别经腹腔免疫BALB/c小鼠,于免疫前、免疫2周和4周后分别检测了ELISA抗体和毒素中和抗体水平,结果表明,rApxIAN免疫组的ELISA抗体显著低于rApxIA免疫组和nApxI免疫组,但rApxIAN免疫组血清中和试验中测定的溶血素单位与rApxIA及天然nApxI免疫组没有显著差异.第二次免疫2周后,用1个LD50的APP血清1型J101株和2型标准菌株攻击试验动物,rApxIAN免疫组对血清1型和2型菌株的保护率分别为80%和100%.