实时荧光定量PCR检测五日热巴通体

• 作者: 孙长俭 张晶波 杨晓 温博海 牛东升 陈梅玲
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 五日热巴通体 实时定量PCR 16S-23S rRNA 巴通体感染
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 510-513,557
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 3871字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2006.06.006

摘要

目的采用TaqMan-MGB探针建立检测五日热巴通体的实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)方法.方法根据五日热巴通体特异的16-23S rRNA间隔区序列设计引物和探针,以克隆的16-23S rRNA间隔区基因片段作DNA模板,建立了检测五日热巴通体实时荧光定量检测方法.结果建立的定量标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.996);与普通PCR相比较,荧光定量PCR检测的灵敏度约为它的200倍.用荧光定量PCR检测其它相关立克次体和细菌,检出结果为阴性.实时荧光定量PCR检测五日热巴通体实验感染小鼠血、脾脏、肝脏和肺组织DNA样本,脾脏和肝脏样本中检出较高水平五日热巴通体DNA,血和肺部检出的目的DNA的水平较低. 结论本研究建立的检测五日热巴通体的实时荧光定量PCR法具有很高的检测灵敏度和特异性,可用于临床患者血样本的检测,作五日热的早期诊断.