融合表达IL-2和EGFP逆转录病毒载体的构建

• 作者: 旭日干 梁浩 石艳春
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 逆转录病毒 载体 白细胞介素-2 增强型绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3158字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2006.01.001

摘要

目的构建融合表达IL-2和EGFP报告基因的逆转录病毒载体.方法设计载体pRevTet-On和pEGFP-C1的接头序列,经酶切连接重组为过渡载体pRevEGFP-C1,同时对质粒pBV220-IL-2和pEGFP-C1进行酶切,连接重组为过渡载体pEGFP-C1-IL-2.分别酶切质粒pRevEGFP-C1和pEGFP-C1-IL-2,琼脂糖凝胶电泳回收目的片段IL-2,并将其连接到pRevEGFP-C1的多克隆位点(MCS)中,转化至E. coli DH5α进行扩增,提取质粒DNA获得重组体pRevEGFP-C1-IL-2.结果经分析鉴定,所构建的重组载体pRevEGFP-C1-IL-2完全正确.结论已成功地构建了融合表达IL-2和EGFP的逆转录病毒载体pRevEG-FP-C1-IL-2.