氯通道ClC-2融合蛋白的原核表达及体外磷酸化

• 作者: 王维忠 辛华 郑雅娟
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 氯通道ClC-2 融合蛋白质类 促分裂原活化蛋白激酶(MAPK) 蛋白质体外磷酸化
• 年，卷（期）: 2006,（11）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1028-1031
• 页数: 4页
• 分类号: R35
• 字数: 3064字
• 语种: 中文

摘要

目的:检测ClC-2是否能被促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)磷酸化,为进一步研究其在细胞增殖、分化过程中的调控机制提供基础.方法:从含有家兔ClC-2 cDNA的质粒pSPORT1中PCR扩增ClC-2胞浆内的羧基端DNA编码序列,构建重组载体pGEX-4T-1/ClC-2CT;重组质粒经酶切、测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21菌株;经异丙基β-D-硫代半乳糖(IPTG)诱导后,通过Gluthathion Sepharose 4B亲和层析柱纯化融合蛋白;并行融合蛋白的体外磷酸化实验.结果:酶切、测序鉴定重组载体pGEX-4T-1/ClC-2CT构建正确,并纯化得到GST/ClC-2CT融合蛋白.而且该融合蛋白能被MAPK磷酸化,而GST不能被MAPK磷酸化.结论:氯通道ClC-2能被MAPK磷酸化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	辛华	吉林大学中日联谊医院胸外科	77	267	9.0	11.0
2	王维忠	吉林大学中日联谊医院中心研究室	30	183	7.0	12.0
3	郑雅娟	吉林大学第二医院眼科	58	195	7.0	11.0