靶向血管内皮生长因子和神经生长因子的shRNA真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 王元元 胡锦 董万利 蒋觉安
• 来源期刊: 江苏医药
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 血管内皮生长因子 神经生长因子 重组质粒
• 年，卷（期）: 2006,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 444-447
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3353字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-3685.2006.05.018

摘要

目的利用RNA干扰(RNAi)技术,构建靶向血管内皮生长因子(VEGF)、神经生长因子(NGF)双基因的短发夹RNA(short hairpin, shRNA)真核表达载体用于胶质瘤基因治疗.方法分别设计并体外合成靶向基因VEGF、NGF的特异性编码shRNA序列的寡核苷酸,克隆到经Bgl Ⅱ-HindⅢ酶切线性化的pSUPER质粒H1启动子下游,构建shRNA重组质粒,进而脂质体介导瞬时转染胶质瘤细胞系U251,半定量RT-PCR检测VEGF mRNA、NGF mRNA表达.结果重组质粒经过酶切鉴定和测序,插入片段的序列大小、位点和方向均与已合成的寡核苷酸的序列完全一致,在瞬时转染胶质瘤细胞后下调了VEGF mRNA、NGF mRNA的表达.结论成功构建靶向基因VEGF、NGF的shRNA真核表达载体,为进一步应用RNAi技术,研究其对胶质瘤的抑制作用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董万利	苏州大学附属第一医院神经内科	192	792	13.0	17.0
2	胡锦	上海交通大学附属第六医院神经外科	36	209	8.0	11.0
3	王元元	苏州大学附属第一医院神经内科	15	27	3.0	4.0
4	蒋觉安	苏州大学附属第一医院神经内科	13	33	3.0	5.0