不相容双质粒共表达人内皮抑素及简化人纤溶酶原饼环区5

• 作者: 孙剑 王健琪 翟朝阳
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 抗血管生成 人内皮抑素 简化人纤溶酶原饼环区5 不相容质粒 共表达
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 839-843
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 5295字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2006.06.005

摘要

目的 构建人内皮抑素(human endostatin,hES)原核表达质粒pET28a/hES并与简化人纤溶酶原饼环区5(predigested human plasminogen kringle 5,predhPK-5)在大肠杆菌中实现共表达. 方法 RT-PCR法从人肝癌组织中扩增人内皮抑素基因,利用基因克隆技术构建原核表达质粒pET28a/hES.在卡那霉素与氨苄青霉素的选择压力下,将其与pGEX-1λT/predhPK-5共同转化E.coli BL21(DE3),并诱导表达重组蛋白.同时从连续培养时间与传代次数两方面检测了共转化子的稳定性. 结果 成功构建了重组质粒pET28a/hES,其与pGEX-1λT/predhPK-5的共转化子在双抗生素压力下可以共存,并在E.coli BL21(DE3)中成功共表达了人内皮抑素及简化的人纤溶酶原饼环区5,其表达量分别占蛋白总量的20%和21%.在双抗性培养基中培养16 h及传代120代,共转化子存活率均大于75%,具有较好的稳定性.结论 不相容质粒pET28a/hES与pGEX-1λT/predhPK-5在大肠杆菌中的成功共表达,对基因共表达方法作了有益探索,验证了不相容质粒共表达方法的可行性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翟朝阳	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学实验室	19	188	7.0	13.0
2	王健琪	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学实验室	4	8	1.0	2.0
3	孙剑	四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学实验室	2	7	1.0	2.0