阴道毛滴虫肌动蛋白cDNA克隆与表达

• 作者: 傅玉才 刘居理 张丽芳 许铭炎 许锦阶
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 阴道毛滴虫 肌动蛋白 重组蛋白表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1058-1060,1080
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|R382.21
• 字数: 2976字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2006.10.002

摘要

目的 克隆阴道毛滴虫肌动蛋白基因片段,表达及纯化肌动蛋白重组蛋白,免疫豚鼠获得抗血清,为进一步研究肌动蛋白在阴道毛滴虫体内定位及其在细胞衰老过程中的作用奠定基础.方法 应用PCR方法获得阴道毛滴虫肌动蛋白基因部分片段,并克隆入表达载体pET-41a,转化大肠埃希菌(E.coli)BL21,IPTG诱导重组质粒表达,亲和层析纯化表达产物,Brandford法测定重组蛋白含量并免疫豚鼠,用SDS-PAGE和Western-blot进行分析鉴定.结果 肌动蛋白基因的PCR产物片段大小500 bp;构建了阴道毛滴虫肌动蛋白基因重组表达质粒;表达了肌动蛋白重组蛋白;SDS-PAGE显示分离纯化的肌动蛋白重组蛋白为47000 u;Western-blot结果表明所获得抗血清可与肌动蛋白重组蛋白在47000 u及阴道毛滴虫总蛋白在41000 u处特异性反应.结论 重组肌动蛋白获得高效表达,其免疫豚鼠获得的抗血清可与阴道毛滴虫肌动蛋白重组蛋白反应,也可识别阴道毛滴虫虫体肌动蛋白,该抗血清可用于进一步的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘居理	汕头大学医学院病原微生物教研室	8	5	1.0	2.0
2	傅玉才	汕头大学医学院病原微生物教研室	115	556	12.0	18.0
3	许锦阶	汕头大学医学院病原微生物教研室	39	184	8.0	12.0
4	许铭炎	汕头大学医学院病原微生物教研室	45	154	5.0	10.0
5	张丽芳	汕头大学医学院病原微生物教研室	3	7	2.0	2.0