含hIGF-1基因腺病毒的构建及在兔骨髓间充质干细胞的表达

• 作者: 丁幸坡 刘伟 罗小辑 邱林 金先庆
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人胰岛素样生长因子-1 腺病毒载体 骨髓间充质干细胞
• 年，卷（期）: 2006,（14）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1495-1498
• 页数: 4页
• 分类号: Q782|R329.23|R373.1
• 字数: 3438字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.14.014

摘要

目的用Adeasy系统构建荧光蛋白基因标记的腺病毒载体Ad-hIGF-1,然后转染兔骨髓间充质干细胞并检测其表达.方法根据GenBank公布的hIGF-1序列设计PCR引物,从质粒pcDNA3.1-hIGF-1中扩增出截短型hIGF-1,亚克隆至pMD-T载体,鉴定后酶切出目的基因插入pAdtrack-CMV中构建成腺病毒穿梭质粒pAdtrack-hIGF-1,经Pme Ⅰ线性化后采用电穿孔法转化至已包含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的BJ5183大肠杆菌中,挑选同源重组质粒线性化后转染HEK293细胞收获腺病毒,然后转染靶细胞兔骨髓间充质干细胞,通过绿色荧光蛋白表达情况以及流式细胞仪、免疫细胞化学等方法检测hIGF-1的表达.结果成功构建了绿色荧光蛋白基因标记的腺病毒Ad-hIGF-1,并在兔骨髓间充质干细胞得以高效表达.结论Adeasy腺病毒系统是基因转染的高效载体系统.腺病毒Ad-hIGF-1转染的骨髓间充质干细胞可作为基因修饰的软骨组织工程种子细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邱林	重庆医科大学儿童医院外科研究室	60	367	11.0	17.0
2	金先庆	重庆医科大学儿童医院外科研究室	165	891	14.0	20.0
3	刘伟	重庆医科大学儿童医院外科研究室	49	180	8.0	11.0
4	罗小辑	重庆医科大学儿童医院外科研究室	64	196	7.0	9.0
5	丁幸坡	重庆医科大学儿童医院外科研究室	5	25	4.0	5.0