纳米载体介导人胰岛素样生长因子1基因转染兔骨髓间充质干细胞及其表达

• 作者: 丁幸坡 付艳丽 王智勇 金先庆
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 纳米载体 人胰岛素样生长因子1 骨髓间充质干细胞 生物材料
• 年，卷（期）: 2008,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 1035-1038
• 页数: 4页
• 分类号: R318.08
• 字数: 4478字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2008.06.007

摘要

目的:构建增强型绿色荧光蛋白基因(enhanced-green fluorescent protein,EGFP)标记的人胰岛素样生长因子(human insulin-like growth factor, hIGF-1)真核表达载体,转染至兔骨髓间充质干细胞,为组织工程关节软骨的构建提供基因改良的种子细胞.方法:实验于2005-03/2006-01在重庆医科大学儿科研究所完成.根据GeneBank公布的hIGF-1序列设计PCR引物,从质粒pcDNA3.1-hIGF-1中扩增出截短型hIGF-1,亚克隆至pMD-T18载体,测序鉴定后酶切出目的基因片段并插入pIRES2-EGFP中,构建成真核表达质粒pIRES2-EGFP-hIGF-1,经PCR及双酶切鉴定正确后用非病毒类纳米材料基因转移载体PAMAM-D介导转入兔骨髓间充质干细胞,通过荧光观察、流式细胞仪、RT-PCR等方法从各个水平检测hIGF-1在细胞的表达.结果:成功构建了增强型绿色荧光蛋白基因标记的真核表达质粒pIRES2-EGFP-hIGF-1,并检测到目的基因hIGF-1在兔骨髓间充质干细胞的理想表达.结论:新型纳米材料PAMAM-D是高效、简便、表达持久的基因转染方法,经IGF-1基因修饰的骨髓间充质干细胞是软骨组织工程种子细胞的理想选择.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金先庆	重庆医科大学儿科研究所外研室	165	891	14.0	20.0
2	丁幸坡	河南省正骨研究院小儿骨科研究室	4	31	2.0	4.0
3	王智勇	河南省正骨研究院小儿骨科研究室	2	6	1.0	2.0
4	付艳丽	河南省正骨研究院小儿骨科研究室	2	6	1.0	2.0