4×35s增强子的克隆及其功能验证

• 作者: 张文隽 杨之帆 陈俊
• 来源期刊: 华中科技大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 4×35s增强子 绿色荧光蛋白基因 裂殖酵母 过表达突变载体
• 年，卷（期）: 2006,（2）
• 页码范围: 118-121
• 页数: 4页
• 分类号: Q943
• 字数: 3340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1671-4512.2006.02.037

摘要

用PCR扩增法获得含4×35s 增强子的DNA片段,酶切后克隆到质粒pREP-GFP中,得到4×35s 增强子插入方向相反的两种表达质粒pREPen1和pREPen2,并进行了测序确认.这两种表达质粒和pREP-GFP同时转化亮氨酸缺陷型裂殖酵母.荧光显微镜观察表明,pREP-GFPen1和pREP-GFPen2转化的酵母细胞,比pREP-GFP转化的酵母细胞所发的绿色荧光强8～10倍,体积大2～5倍.使用流式细胞仪和Lowry方法分别测定三种细胞平均荧光强度和蛋白量,测量结果表明:2×104细胞的平均荧光强度分别为1 800 U,1 800 U 和200 U;2×104细胞的GFP含量分别为200 μg,200 μg 和25 μg.这一结果证明4×35s 增强子增强了gfp gene的表达水平,所克隆的4×35s 增强子具有正常的功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈俊	武汉科技大学化学资源环境学院	33	100	6.0	9.0
2	杨之帆	武汉大学生命科学学院	7	133	3.0	7.0
3	张文隽	武汉大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0