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摘要:
目的利用抑制性消减杂交(SSH)技术构建神经鞘氨醇磷酸胆碱(SPC)对人真皮成纤维细胞的差异表达cDNA消减杂交文库,从中克隆出差异表达基因.方法原代培养人皮肤成纤维细胞;提取经SPC处理和未处理的成纤维细胞总RNA,合成cDNA,进行2次消减杂交及2次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建SPC作用于人真皮成纤维细胞的差异表达cDNA消减杂交文库,用RNA印迹验证阳性克隆,测序并登陆基因库寻找同源性基因.结果成功构建了SPC作用于人真皮成纤维细胞的差异表达cDNA文库;从实验组筛查的28个差异表达克隆中确定了6个差异表达基因,其中已知基因5个、新基因1个,分别为基质金属蛋白酶2,血小板反应蛋白1,催产素受体,锌指转录因子,铁传递蛋白受体等.结论神经鞘氨醇磷酸胆碱可上调人真皮成纤维细胞基质金属蛋白酶、血小板反应蛋白1、催产素受体、锌指转录因子、铁传递蛋白受体等基因表达.
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文献信息
篇名 神经鞘氨醇磷酸胆碱对人成纤维细胞差异表达基因的筛选
来源期刊 中华皮肤科杂志 学科 医学
关键词 成纤维细胞 基因文库 神经鞘氨醇磷酸胆碱 抑制性消减杂交
年,卷(期) 2006,(7) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 381-384
页数 4页 分类号 R3
字数 2962字 语种 中文
DOI 10.3760/j.issn:0412-4030.2006.07.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 金东成 1 0 0.0 0.0
2 金昌德 韩国忠南大学医学部皮肤科 1 0 0.0 0.0
3 李增勋 韩国忠南大学医学部皮肤科 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
节点文献
成纤维细胞
基因文库
神经鞘氨醇磷酸胆碱
抑制性消减杂交
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华皮肤科杂志
月刊
0412-4030
32-1138/R
大16开
南京市玄武区蒋王庙街12号
28-30
1953
chi
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