人NKX3.1基因启动子的克隆及在不同肿瘤细胞系中启动子活性的测定

• 作者: 姜安丽 孔峰 张建业 张鹏举 胡晓燕 贺美兰 陈蔚文
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 基因 NKX3.1 启动子 细胞系 基因表达
• 年，卷（期）: 2006,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1987-1992
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 字数: 1076字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2006.10.026

摘要

目的:克隆NKX3.1基因启动子并检测其启动子活性,为研究NKX3.1基因转录调控的基本机制奠定基础.方法:采用PCR方法从人基因组中扩增NKX3.1基因上游1.04 kb启动子片段并分别克隆到报道基因载体pGL3-basic和pEGFP-1中,通过转染细胞、荧光素酶活性测定及荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达,检测其启动子活性.结果:DNA测序结果证实克隆的1.04 kb启动子片段序列正确;pGL3-1.04 kb启动子转染LNCaP细胞后,双荧光素酶活性测定M1/M2=2.7,为pGL3-control活性的1.5倍,为pGL3-basic活性的50倍.表明克隆的人NKX3.1基因上游1.04 kb片段具有较强的启动子活性.为检测此1.04 kb启动子在不同组织细胞中的活性,分别将pGL3-1.04 kb启动子和pEGFP-1.04 kb启动子转染入不同的肿瘤细胞系,检测荧光素酶和绿色荧光蛋白的表达.结果显示1.04 kb启动子在前列腺癌细胞LNCaP中活性最高.采用TRANSFAC数据库分析,发现在1 040 bp片段内含有多种顺式作用元件,它们的功能性将需要进一步实验证明.结论:克隆的人NKX3.1基因上游1.04 kb片段具有较强的启动子活性,并且在前列腺癌细胞LNCaP中活性最高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔峰	山东大学医学院生物化学教研室	38	129	5.0	9.0
2	胡晓燕	山东大学医学院生物化学教研室	48	205	7.0	12.0
3	张建业	山东大学医学院生物化学教研室	32	154	6.0	11.0
4	陈蔚文	山东大学医学院生物化学教研室	24	83	5.0	8.0
5	姜安丽	山东大学医学院生物化学教研室	19	76	5.0	8.0
6	贺美兰	山东大学医学院生物化学教研室	9	17	2.0	3.0
7	张鹏举	山东大学医学院生物化学教研室	15	28	3.0	4.0