用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素的方法研究

• 作者: 何承伟 刘芳 马卫列
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: endostatin 硫氧还蛋白融合表达系统 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（14）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1476-1478
• 页数: 3页
• 分类号: Q503|Q51|Q591.2
• 字数: 3637字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.14.008

摘要

目的探索用硫氧还蛋白融合表达系统表达小鼠内皮抑素(endostatin)重组蛋白的最佳生产工艺路线.方法用pThioHis-endo重组质粒转化不同的大肠杆菌BL21、JM109、DH5α,经几种不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(isopropylthio-galactoside,IPTG)诱导表达重组融合蛋白,或诱导表达不同时间后,采用SDS-PAGE分析表达产物;按所优化的条件进行重组内皮抑素的表达、包涵体的提取、洗涤、变性和复性,最后经Ni+柱纯化,再通过SDS-PAGE分析纯化的结果.结果3种大肠杆菌表达效果相差无几,最佳IPTG的浓度0.9 mmol/L,最佳诱导时间为5 h,经Ni+柱纯化后可获得可溶性的重组内皮抑素.结论利用本实验的优化条件可获得高产量、高纯度、可溶性的小鼠内皮抑素重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马卫列	广东医学院生物化学教研室	22	39	4.0	5.0
2	何承伟	广东医学院生物化学教研室	35	278	9.0	15.0
3	刘芳	广东医学院生物化学教研室	10	46	4.0	6.0