SARS冠状病毒N蛋白在酵母中的表达纯化及抗原性分析

• 作者: 张竞 张麒 李东云 李玉珍 郭旭
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: SARS冠状病毒 N蛋白 基因表达 毕赤巴斯德酵母
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 59-62
• 页数: 4页
• 分类号: R373.9|R392.11|R394.2
• 字数: 3656字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2006.01.021

摘要

目的研究人SARS冠状病毒核壳N蛋白在Pichia pastoris酵母中的表达,获得具有生物学活性的重组N蛋白,并鉴定表达蛋白的抗原性,为下一步的研究奠定基础.方法合成引物扩增SARS冠状病毒N基因,插入含AOX1启动子的Pichiapastoris酵母表达载体中,转化酵母宿主菌KM71H、X-33、GS115,筛选阳性转化子,摇瓶培养,用甲醇诱导表达.表达产物经镍离子柱亲和层析纯化后,以抗SARS冠状病毒N蛋白的小鼠单抗、兔多抗及SRAS病人阳性血清鉴定其抗原性.结果SDS-PAGE和免疫学分析显示,酵母转化子仅在KM71H、X-33中有Mr约70 000的诱导蛋白,表达产物具有良好的抗原性和特异性.结论在酵母表达系统中,初步实现了SARS冠状病毒核壳N蛋白的有效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉珍	解放军总医院麻醉科	19	95	6.0	9.0
2	郭旭	解放军总医院麻醉科	35	138	6.0	9.0
3	张麒	解放军总医院呼吸科	5	10	2.0	2.0
4	张竞	解放军总医院胸外科	19	104	7.0	9.0
5	李东云	解放军总医院呼吸科	1	0	0.0	0.0