北京棒杆菌邻氨基苯甲酸合成酶基因的克隆、序列分析及表达

• 作者: 丁久元 张春花 张英姿 李开 王宇 赵智 陈小芳
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 北京棒杆菌 邻氨基苯甲酸合成酶 L-色氨酸
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 48-53
• 页数: 6页
• 分类号: Q5
• 字数: 6286字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2007.01.011

摘要

以北京棒杆菌(Corynebacterium pekinense)野生株AS1.299和突变株PD-67的基因组为模板,用PCR方法扩增了邻氨基苯甲酸合成酶(AS)基因(trpEG)片段和前端控制序列.核酸序列分析结果表明,该片段全长3374bp,包含3个ORF,推测分别为前导肽基因trpL、AS component Ⅰ基因trpE和AS component Ⅱ基因trpG.C.pekinense野生株AS1.299与突变株PD-67相比较,trpL基因完全一样;trpE基因有6个碱基的突变,导致了5个氨基酸残基的改变;trpG基因有1个碱基的突变,导致了1个氨基酸残基的改变;同时它们在-35序列处还有一个A→G的突变.通过同源性比较发现,C.pekinense AS1.299与Corynebacterium glutamicum ATCC 13032和Brevibacterium lactofermentum的亲缘关系是很近的.trpL基因上游存在启动子区域,并能被Escherichia coli的RNA聚合酶所识别,实现异源互补.野生型和突变型AS基因在C.pekinense AS1.299和PD-67中都得到表达,并且重组菌相对于宿主菌的酶活都有了很大提高.摇瓶发酵实验结果表明,带有突变型AS基因的PD-67重组菌生长比较慢,稳定期比PD-67推迟24h,但产生的L-色氨酸比PD-67高22.39%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王宇	中国科学院微生物研究所	211	1906	23.0	32.0
2	赵智	中国科学院微生物研究所	18	96	7.0	8.0
3	张春花	中国科学院微生物研究所	2	18	2.0	2.0
4	张英姿	中国科学院微生物研究所	19	119	8.0	9.0
5	丁久元	中国科学院微生物研究所	18	121	8.0	9.0
6	李开	中国科学院微生物研究所	2	19	2.0	2.0
10	陈小芳	中国科学院微生物研究所	4	40	2.0	4.0