猪带绦虫六钩蚴TSOL16基因的表达及免疫原性分析

• 作者: LUO Xue-nong 丁军涛 岳城 才学鹏 景志忠 王颖 马全英 骆学农
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪带绦虫六钩蚴 TSOL16基因 克隆 表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2007,（12）
• 所属期刊栏目: 医原生物学
• 页码范围: 920-924
• 页数: 5页
• 分类号: S852.734|Q781
• 字数: 4420字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2007.12.004

摘要

本研究采用RT-PCR技术扩增猪带绦虫六钩蚴TSOL16免疫原基因,将扩增产物与pMD18-T载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴定后进行测序;构建TSOL16基因的pGEX-4T-1原核表达载体,用IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE、Western blot分析;将所表达的蛋白免疫小鼠,经ELISA检测血清抗体验证其免疫原性.结果显示:所克隆的TSOL16基因片段长度为559 bp,含有1个402 bp的开放阅读框架,编码134个氨基酸,与已报道的猪带绦虫六钩蚴TSOL16基因核苷酸序列同源性为99%;表达的融合蛋白大小为40 Ku,并能被猪带绦虫六钩蚴阳性血清所识别;免疫小鼠在1周后即检测到血清抗体,第30 d即达到较高水平,说明该融合蛋白具有较好的免疫原性.