大鼠脑组织NT-3融合蛋白的表达、纯化及抗体制备

• 作者: 刘方 朱庆生 朱锦宇 李志全 胡蕴玉
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 大鼠 NT-3基因 基因表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 324-328
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 2822字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2007.03.021

摘要

目的 克隆大鼠脑组织神经营养素3(NT-3)基因,原核诱导表达并纯化,制备高效价抗体,为研究其对周围神经损伤修复的影响提供实验基础. 方法 用RT-PCR法扩增目的 基因,依次克隆入pMD-18T载体及亚克隆入pRSET-A原核表达载体.导入大肠杆菌BL21经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定后用镍柱纯化.免疫家兔制备特异性抗体. 结果 RT-PCR得到777 bp的片断,酶切鉴定及测序证实与GeneBank中大鼠NT-3序列一致,成功构建了原核表达载体pRSET-A-NT-3.导入BL21诱导得到一条约34 ku的新蛋白带.免疫家兔获得1∶64000的高效价特异性抗大鼠NT-3血清.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李志全		1	0	0.0	0.0
2	胡蕴玉		1	0	0.0	0.0
3	朱庆生		1	0	0.0	0.0
4	朱锦宇		1	0	0.0	0.0