广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子在大肠杆菌中的表达

• 作者: 周元聪 宋慧 张学荣 江涛 舒雨雁
• 来源期刊: 中国药理学与毒理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 眼镜蛇 蛇毒 神经生长因子 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 265-270
• 页数: 6页
• 分类号: R996.3
• 字数: 3088字
• 语种: 英文

摘要

目的 采用基因工程技术,在大肠杆菌(E.coli)中表达广西眼镜蛇(黑眼镜蛇)蛇毒神经生长因子(NGF)成熟蛋白并检测其生物活性.方法 将天然广西眼镜蛇蛇毒的NGF蛋白基因克隆至融合表达载体pET-40b(+)中,以C端融合了6个组氨酸的形式在E.coli BL21(DE3)通过异丙基硫代半乳糖苷诱导表达NGF蛋白.超声破菌后,将上清液经Ni2+-NTA柱纯化,收集并冻干NGF融合蛋白,用蛋白印迹法分析其NGF抗原活性,并通过促PC12细胞生长法观察其生物活性.结果 经蛋白印迹分析可知在38 ku处的条带具有NGF抗原活性.加入天然蛇毒NGF,生长轴突的PC12细胞为(83±3)%,重组品为(21±3)%,表明经纯化的融合蛋白具有NGF生物活力,但活性弱于天然蛇毒NGF.结论 在大肠杆菌中可以表达出有活性的蛇毒NGF蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋慧	广西医科大学化学教研室	40	219	9.0	13.0
5	舒雨雁	广西医科大学蛇毒研究所	46	277	9.0	13.0
6	张学荣	广西医科大学蛇毒研究所	42	141	6.0	9.0
7	江涛	中国科学院生物物理研究所	26	192	7.0	13.0
8	周元聪	中国科学院上海生化与细胞研究所	35	170	8.0	12.0