广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子基因在NIH3T3细胞中的表达

• 作者: 农君 宋慧 张学荣 班建东 石庆秋 陈缨 韦敏
• 来源期刊: 广西医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 蛇毒 神经生长因子 基因克隆 真核表达载体 NIH3T3细胞系
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 846-849
• 分类号: R33
• 字数: 2180字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-930X.2010.06.008

摘要

目的:构建广西眼镜蛇蛇毒神经生长因子(NGF)基因的真核表达载体pcDNA3.1(一)-NGF,并在NIH3T3细胞中进行表达.方法:采用RT-PCR的方法扩增蛇毒NGF的基因片段,将目的基因、真核表达载体pcDNA3.1(一)分别酶切后回收,连接,转化而构建重组表达载体pcDNA3.1(一)-NGF,经酶切和测序对重组体进行鉴定.利用脂质体LipofectamineTM2000方法转染NIH3T3细胞,对阳性克隆裂解上清中NGF的表达用SDS-PAGE、Western-blot的方法检测.结果:重组载体经酶切、测序分析,插入的基因片段为表达蛇毒NGF的基因,NGF基因在NIH3T3细胞中获得表达.结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(一)-NGF,并检测出在哺乳动物细胞NIH3T3中表达,为进一步开展NGF基因治疗神经系统的疾病奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋慧	广西医科大学药学院	40	219	9.0	13.0
2	韦敏		5	21	2.0	4.0
3	班建东	广西医科大学医学科学实验中心	24	149	8.0	11.0
4	陈缨	广西医科大学医学科学实验中心	7	6	2.0	2.0
5	张学荣	广西医科大学医学科学实验中心	42	141	6.0	9.0
6	石庆秋	南宁中心血站	3	10	2.0	3.0
7	农君	广西医科大学医学科学实验中心	5	6	2.0	2.0