猫白介素-18基因的克隆、序列分析及其表达

• 作者: 乔军 夏咸柱 杨松涛 鞠会艳 黄耕
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猫白介素-18基因 克隆 序列分析 大肠杆菌表达
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 198-202
• 页数: 5页
• 分类号: S188
• 字数: 3157字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2007.02.003

摘要

用猫白介素18(interleukin,IL-18)基因特异性引物对刀豆蛋白(ConA)刺激后猫外周血单核细胞(PBMCf)总RNA进行了RT-PCR扩增,并将扩增产物纯化后克隆入pMD18-T中进行核苷酸序列测定.结果该基因全长579 bp,编码192个氨基酸(GenBank登录号:DQ100372).在推导的猫IL-18氨基酸序列中,无信号肽序列和潜在的N-联糖基化位点,但存在4个Cys残基.与不同物种IL-18相比,猫IL-18与犬、羊、牛和猪IL-18核苷酸序列有较高的同源性,分别为89.8%、88.6%、88.4%和88.1%,但与小鼠和鸡IL-18有明显的种属差异.将目的基因片段进一步亚克隆到大肠杆菌(Escherichiacoli)表达载体pET28a中构建了重组质粒pETIL-18,转化大肠杆菌BL21(DE3),并用IPTG诱导.结果重组菌菌体裂解物经SDS-PAGE电泳可检测到分子量为27.5 kD的重组目的蛋白.经凝胶薄层扫描,目的蛋白表达量可占菌体蛋白的13.6%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鞠会艳	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	23	122	6.0	10.0
3	夏咸柱	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	59	634	15.0	23.0
4	杨松涛	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	22	111	6.0	10.0
6	黄耕	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	22	267	9.0	16.0
9	乔军	解放军军事医学科学院军事兽医研究所	20	427	8.0	20.0