人膀胱癌BLZ211细胞cDNA文库的构建分析

• 作者: 李旭 陈玲 陈葳
• 来源期刊: 中国医院用药评价与分析
• 学科: 医学
• 关键词: BLZ211细胞株 膀胱癌细胞株 cDNA表达文库
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 用药观察
• 页码范围: 61-64
• 页数: 4页
• 分类号: R329.2
• 字数: 3321字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-2124.2007.01.021

摘要

目的:构建人膀胱癌BLZ211细胞表达型cDNA文库,为肿瘤抗原的筛选奠定工作基础.方法:提取BLZ211细胞总RNA,分离mRNA.反转录合成双链cDNA,削平cDNA末端,连接EcoRI适配子,磷酸化EcoRl适配子5'端,XhoI酶切,Sephaeryl-S400柱除去小于400bp cDNA片段,与λZAP表达栽体连接,包装蛋白包装后建成eDNA文库;取出1μl倍比稀释感染大肠杆菌XL1-Blue-MRF',测定文库大小、重组率;随机挑取7个噬斑,在ExAssist辅助性噬茼体的作用下,释放出PBK-CMV噬菌粒;感染大肠杆菌XLOLR,铺于卡那霉素抗性的JB平板;挑取克隆,37℃震摇过夜;抽提质粒,经EcoRI和XhoI酶切后,初步确定片段的大小及多样性.结果:构建成含1.39×106重组子的BLZ211细胞cDNA文库,重组子平均插入外源片段长约1.3kb.结论:所建文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李旭	西安交通大学医学院附属第一医院试验医学中心	136	613	11.0	16.0
2	陈葳	西安交通大学医学院附属第一医院试验医学中心	135	538	11.0	15.0
3	陈玲	西安交通大学医学院附属第一医院肿瘤科	27	117	7.0	9.0