用SELEX技术筛选环孢霉素A适体

• 作者: 兰小鹏 吴文冰 李卫滨 杨湘越
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 环孢霉素A 适体 随机单链寡核苷酸序列文库
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 778-780
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3573字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2007.05.015

摘要

目的:运用指数富集的配体系统进化(SELEX)技术筛选并鉴定环孢霉素A(CsA)特异性适体.方法:合成全长78个核苷酸中间含35个随机序列的随机单链DNA(ssDNA)文库,通过SELEX方法,以CsA为靶标、磁珠为筛选介质,利用生物素-链亲和素-辣根过氧化物酶系统检测每轮ssDNA文库与CsA的亲和力,筛选针对CsA的适体,将最后一轮筛选产物克隆测序,并运用相关软件进行一级结构和二级结构分析.结果:经过10轮筛选,ssDNA文库与CsA的亲和力呈上升趋势,随机挑选的19个克隆适体根据一级结构的同源性可分为5个家族,二级结构预测以茎环(发夹)为主.结论:通过改良SELEX方法筛选得到了CsA特异性的适体.