结核分枝杆菌38 ku蛋白的制备及其抗原性研究

• 作者: 周丽蓉 徐敬华 王国治 罗永艾
• 来源期刊: 中国实用内科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 分枝杆菌,结核 38 ku蛋白 基因表达 抗原性 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2007,（24）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1955-1957
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 3191字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-2194.2007.24.023

摘要

目的 基因克隆、表达、纯化结核分枝杆菌38 ku蛋白,研究其抗原性,评价其在血清学诊断中的价值.方法 2003年2月至2004年3月在中国药品生物制品检定所菌苗室以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,通过聚合酶链反应(PCR)方法对38 ku蛋白基因进行扩增,以PET-30a(+)为载体构建重组质粒,在大肠埃希菌中表达38 ku蛋白,通过金属离子螯合亲和层析方法纯化重组蛋白,免疫印迹和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分析该重组蛋白的抗原性.结果 构建了具有正确基因序列的38 ku蛋白重组质粒,在大肠埃希菌BL21(DE3)中以包涵体形式表达,经过一步金属离子螯合亲和层析后得到纯度为92.7%的目的 蛋白.免疫印迹试验结果表明该蛋白能与羊抗结核血清发生特异免疫结合反应.应用ELISA方法对结核血清参考品进行检测,敏感度和特异度分别为80.5%(33/41)和96.0%(25/26).结论 大肠埃希菌工程菌以包涵体的形式表达38 ku蛋白,该蛋白具有良好的免疫原性,可望成为结核血清学的诊断抗原之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗永艾	重庆医科大学附属第一医院肺科	178	1476	20.0	30.0
2	王国治	中国药品生物制品检定所菌苗室	101	521	10.0	16.0
3	周丽蓉	重钢总医院呼吸科	4	10	2.0	3.0
4	徐敬华	中国药品生物制品检定所菌苗室	3	11	2.0	3.0