腺病毒载体介导SCL基因转染Cajal间质细胞及其表达

• 作者: 刘宝华 张林 李春穴 童卫东
• 来源期刊: 中华消化外科杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 腺病毒载体 干细胞白血病基因 同源重组 转染 Cajal间质细胞
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 132-135
• 页数: 4页
• 分类号: Q782
• 字数: 3448字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-9752.2007.02.016

摘要

目的 构建含有人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因的重组腺病毒载体,并观察其对Cajal间质细胞的转染及其介导的SCL基因的表达.为下一步在体转染Cajal间质细胞,观察其对Cajal间质细胞表型逆转的影响奠定基础.方法 利用Ad-Easy系统、细菌内同源重组法快速构建重组腺病毒Ad-GFP/SCL.通过观察绿色荧光蛋白的表达评估重组腺病毒对培养的Cajal间质细胞的转染效率.通过RT-PCR法分析转染Cajal间质细胞后SCL mRNA的表达.结果 酶切鉴定及PCR结果证明成功构建了含有人SCL基因的重组腺病毒,病毒滴度为1.6×1011 pfu/ml;对Cajal间质细胞的转染率高达100%;RT-PCR法检测转染Cajal间质细胞后SCL mRNA有表达.结论 成功构建的含人SCL基因的重组腺病毒对Cajal间质细胞有很强的转染能力,可介导SCL基因在Cajal间质细胞中表达.