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腺病毒介导的EGFP基因在大鼠骨髓间质干细胞中的高效表达
腺病毒介导的EGFP基因在大鼠骨髓间质干细胞中的高效表达
作者:
姜勇
孙学刚
宋革
张秀明
曹永宽
李树浓
李红乐
邢飞跃
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
骨髓
干细胞
腺病毒载体
细胞分化
荧光蛋白
摘要:
目的:研究复制缺陷型腺病毒感染骨髓间质干细胞介导外源基因表达的可行性及感染效率.方法:在体外低密度扩增大鼠骨髓间质干细胞(rMSC), 用细菌同源重组法构建巨细胞病毒(CMV)驱动的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因腺病毒载体(pAd-EGFP), 用293包装细胞制备腺病毒,用EGFP重组腺病毒感染rMSC,观察重组腺病毒携带基因在MSC中的感染和表达情况,用细胞计数法和流式细胞仪分析感染效率.用血清撤离加入β-巯基乙醇诱导Ad-EGFP感染的rMSC向神经样细胞定向分化.结果:Ad-EGFP可高效感染rMSC, 感染率为(36±2)%, 而脂质体法转染质粒pTrack-GFP在rMSC转染效率非常低且不易成功; Ad-EGFP感染后的不同扩增代数的rMSC在受到β-巯基乙醇的诱导分化后在荧光显微镜下呈典型的突触形式.免疫组化鉴定发现这些诱导细胞表达神经元特异烯醇化酶(NSE), 表明腺病毒介导外源基因转染后rMSC仍具有分化为神经样细胞的潜能. 结论:腺病毒载体具有较高的介导外源基因表达于rMSC的效率,腺病毒载体介导的EGFP基因能够示踪rMSC分化为神经样细胞的过程.
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神经干细胞
脑源性神经营养因子
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腺病毒载体
免疫组织化学
重组腺病毒转染大鼠骨髓间质干细胞的研究
腺病毒
基因转移
基因表达
骨髓
间质干细胞
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篇名
腺病毒介导的EGFP基因在大鼠骨髓间质干细胞中的高效表达
来源期刊
中国病理生理杂志
学科
医学
关键词
骨髓
干细胞
腺病毒载体
细胞分化
荧光蛋白
年,卷(期)
2003,(3)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
293-296
页数
5页
分类号
Q78|R338.8
字数
3493字
语种
中文
DOI
10.3321/j.issn:1000-4718.2003.03.002
五维指标
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期刊影响力
中国病理生理杂志
主办单位:
中国病理生理学会
出版周期:
月刊
ISSN:
1000-4718
CN:
44-1187/R
开本:
大16开
出版地:
广东省广州市黄埔大道西601号
邮发代号:
46-98
创刊时间:
1985
语种:
chi
出版文献量(篇)
11461
总下载数(次)
3
总被引数(次)
84945
相关基金
国家重点基础研究发展计划(973计划)
英文译名:
National Basic Research Program of China
官方网址:
http://www.973.gov.cn/
项目类型:
学科类型:
农业
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