AdMax系统构建腺病毒载体介导SCL基因转染Cajal样间质细胞及其表达

• 作者: 丁国富 周建民 屠松 杨发英 牛世杰 王勤章
• 来源期刊: 临床与实验病理学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞白血病基因 腺病毒载体 转染 Cajal样间质细胞
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 33-37
• 分类号: R33
• 字数: 3837字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7399.2012.01.011

摘要

目的 构建含有人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的转染及其介导SCL基因的表达.方法 采用PCR方法从含人SCL基因质粒中扩增SCL基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,构建重组穿梭质粒pDC315-EGFP/SCL,在脂质体介导下与腺病毒辅助大质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染293细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒pDC315-SCL经HEK293细胞扩增,纯化后测定病毒滴度.通过观察绿色荧光蛋白的表达评估重组腺病毒对Cajal样间质细胞的转染率,RT-PCR法分析转染Cajal样间质细胞后SCL mRNA的表达.结果 PCR结果和Western blot法检测证实pDC315-SCL重组腺病毒载体构建成功,滴度达到1×1010 PFU/ml,对膀胱Cajal样间质细胞的转染率高达98%,RT-PCR法检测转染Cajal样间质细胞后SCL mRNA有表达.结论 成功构建pDC315-SCL重组腺病毒载体对Cajal样间质细胞有很强的转染能力,可介导SCL基因在Cajal样间质细胞的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王勤章	石河子大学医学院	108	274	9.0	11.0
2	丁国富	石河子大学医学院	59	217	9.0	11.0
3	屠松	甘肃省张掖市人民医院泌尿外科	14	19	3.0	4.0
4	牛世杰	甘肃省张掖市人民医院泌尿外科	7	16	3.0	4.0
5	周建民	甘肃省张掖市人民医院泌尿外科	4	11	2.0	3.0
6	杨发英	甘肃省张掖市人民医院泌尿外科	6	13	2.0	3.0