乙型肝炎病毒XTP12在大肠埃希菌中表达及生物信息学分析

• 作者: 成军 李晓光 洪源 王慧芬
• 来源期刊: 实用肝脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 X蛋白 反式激活蛋白 生物信息学
• 年，卷（期）: 2007,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 361-365
• 页数: 5页
• 分类号: R5
• 字数: 4680字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-5069.2007.06.001

摘要

目的 构建乙型肝炎病毒X蛋白反式激活蛋白2(XTP12)原核表达载体并诱导其在大肠埃希菌中表达.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,以从HepG2细胞提取的mRNA为模板,扩增XTP12目的基因片段,T-A克隆连接到pGEM-T载体,测序正确后将目的片段插入原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导XTP12融合蛋白的表达, 并通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blot免疫印迹分析和证实融合蛋白的表达.生物信息学方法对蛋白结构和功能进行预测.结果 利用RT-PCR 扩增获得XTP12基因片段,IPTG诱导BL21宿主菌成功表达了XTP12融合蛋白,经SDS-PAGE和 Western blot分析得到证实.生物信息学预测结果显示此蛋白富含螺旋结构,为非跨膜蛋白,无信号肽.结论 利用大肠埃希菌BL21(DE3)能够成功表达XTP12蛋白,结合生物信息学分析结果,为今后研究XTP12蛋白的免疫原性和生物学特性奠定了良好的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李晓光		39	118	8.0	9.0
2	成军	北京地坛医院传染病研究所	210	843	13.0	20.0
3	洪源	北京地坛医院传染病研究所	44	70	5.0	6.0
4	王慧芬	中国人民解放军第302医院肝衰竭治疗研究中心	11	53	4.0	7.0