CTLA-4/Ig在CHO/DG44细胞中的高效表达

• 作者: 刘全胜 许松梅 郑立恒
• 来源期刊: 四川大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: CTLA-4/Ig融合蛋白 pMMGR 转染 共扩增 地塞米松 诱导 高表达 亲和层析 纯化
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 370-373
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3459字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-173X.2007.03.002

摘要

目的 研究CTLA-4/Ig融合蛋白在CHO真核表达系统中的表达,并纯化所表达的CTLA-4/Ig融合蛋白,为其功能研究和临床应用奠定基础.方法 将线性化的pMM-CTLA-4-IgG4/WG和pMMGR转染CHO/DG44细胞,对阳性克隆进行无血清悬浮培养,Western blot检测细胞培养液中CTLA-4/Ig融合蛋白的表达,筛选出高效稳定表达CTLA-4/Ig融合蛋白的CHO细胞;Protein A亲和层析纯化所表达的CTLA-4/Ig融合蛋白;SDS-PAGE电泳、Western印迹等对纯化的CTLA-4/Ig融合蛋白的相对分子质量、纯度、抗原特异性进行生物学鉴定.结果 筛选出了能高效稳定表达CTLA-4/Ig融合蛋白的CHO细胞;纯化后的CTLA-4/Ig融合蛋白在SDS-PAGE电泳后出现一条与预期相对分子质量大小相符的蛋白条带;该蛋白能与羊抗人IgG-HRP抗体特异结合.结论 获得了能够高效稳定表达具有生物学活性的CTLA-4/Ig融合蛋白的CHO细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘全胜	四川大学生命科学学院细胞生物学教研室	8	8	2.0	2.0
2	郑立恒	四川大学生命科学学院细胞生物学教研室	5	6	1.0	2.0
3	许松梅	四川大学生命科学学院细胞生物学教研室	4	5	1.0	2.0