小鼠结肠癌RNA转染mIL-12修饰的树突状细胞诱发抗肿瘤活性

• 作者: 宋海珠 张群 汪灏 王杰军 王靖华 管晓翔 耿怀成 褚晓源 陈龙邦
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RNA 白细胞介素-12 树突状细胞 基因治疗 结肠癌 细胞毒性T淋巴细胞
• 年，卷（期）: 2007,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 53-58
• 页数: 6页
• 分类号: R73
• 字数: 4455字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2007.01.011

摘要

目的:研究以小鼠结肠癌细胞CT-26 RNA作为抗原体外转染经mIL-12基因修饰的树突状细胞(dendritic cells,DC),观察其诱导特异性抗肿瘤的效应. 方法:小鼠骨髓细胞体外以rmGM-CSF、rmIL-4诱导培养获取树突状细胞,流式细胞术检测纯度;293细胞扩增携带mIL-12基因的重组腺病毒,体外转染树突状细胞;Trizol法提取CT-26细胞总RNA,应用TransMessenger体外转染mIL-12基因修饰的树突状细胞,免疫接种小鼠. ELISA法检测细胞上清及小鼠血液中mIL-12水平,LDH释放法检测小鼠体内细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性.结果:小鼠骨髓细胞经诱导培养后,获得大量高纯度的树突状细胞,流式细胞术检测CD11c+的树突状细胞＞90%;提取的CT-26细胞总RNA体外经TransMessenger介导,转染mIL-12基因修饰的树突状细胞后,回输小鼠,可以诱导体内生成较高水平的特异性CTL活性,亲本肿瘤接种后小鼠100%长期存活,而以该RNA转染Ad-LacZ修饰DC后的对照组及RNA转染DC的对照组,诱导机体生成的特异性CTL活性显著低于实验组(P＜0.01),亲本肿瘤接种后小鼠60%长期存活,DC、PBS对照组则均未诱导机体生成特异性CTL活性,小鼠无长期存活.结论: 树突状细胞经小鼠结肠癌CT26细胞RNA转染和mIL-12基因修饰后免疫接种小鼠,可在体内有效提呈肿瘤抗原,诱导机体产生高水平的CTL,更有效地诱发特异性抗肿瘤效应.