结肠癌细胞总RNA电穿孔法体外转染成熟树突状细胞

• 作者: 卜丽梅 张桂珍 杜珍武 杨蕾 邱军 霍锐
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 树突细胞 电穿孔 RNA
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 271-275
• 页数: 5页
• 分类号: R73-352
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨结肠癌细胞总RNA电穿孔法转染成熟树突状细胞(mDCs)的转染效率及对树突状细胞(DCs)特征和功能的影响,为DCs核酸肿瘤疫苗的制备及其在临床应用奠定基础.方法:用重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素4(rhlL-4)将人外周血单核细胞(PBMC)诱导成未成熟树突状细胞(imDCs),肿瘤细胞坏死因子-α(TNF-α)作用24 h刺激其成熟.实验设为imDCs组和mDCs组.Trizol法提取特异表达癌胚抗原(CEA)的结肠癌细胞SW480总RNA,电穿孔法将总RNA转染mDCs,设为RNA转染DCs组.流式细胞术检测各组细胞表面分子标志变化和转染DCs组的CEA蛋白表达情况.ELISA法检测各组细胞IL-12分泌水平.结果:rhGM-CSF、rhlL-4、TNF-a能将PBMC诱导成具有典型毛刺样突起形态学特征的DCs.imDCs组DCs表面CDla表达呈阳性,CD80弱阳性,CD83阴性.mDCs组DCs表面CDla、CD83、CD80表达均呈阳性.RNA转染DCs组DCs表面CDla、CD83、CD80表达均呈阳性.总RNA转染mDCs后4 h检测到CEA蛋白表达.mDCs组、RNA转染DCs组IL-12分泌量与imDCs组比较均显著升高(P<0.01),而mDCs组与RNA转染DCs组比较差异无显著性(P>0.05).结论:结肠癌细胞总RNA可通过电穿孔法转染mDCs并表达CEA蛋白,电穿孔不改变mDCs的表面分子特征及功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张桂珍	吉林大学中日联谊医院中心研究室	109	466	11.0	16.0
2	杜珍武	吉林大学药学院基因工程教研室	59	140	6.0	8.0
3	杨蕾	吉林大学中日联谊医院镜检科	48	186	8.0	10.0
4	霍锐	吉林大学药学院基因工程教研室	8	85	5.0	8.0
5	邱军	吉林省人民医院病理科	1	2	1.0	1.0