高迁移率族蛋白1在大肠埃希菌中的高效表达以及纯化

• 作者: 任君萍 姜南艳 张伟 张惠中 沈建军 顾炳权
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: HMGB1 逆转录 聚合酶链反应 基因表达
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 26-28
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2480字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2007.03.008

摘要

目的 克隆、表达高迁移率族蛋白1(HMGB1).方法 从人外周血淋巴细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得HMGB1基因;将该基因克隆到PMD18-T载体中,测序鉴定;将HMGB1基因插入pET32-A表达载体中,30℃诱导表达4h,进行SDS-PAGE分析;目的蛋白在变性条件下经Ni2+-NTA亲和层析纯化后用Western-Blot证实.结果 DNA测序证明,获得了HMGB1基因,其序列与Gen Bank中报道序列完全一致;SDS-PAGE分析表明,HMGB1蛋白在原核中获得高效表达,表达量约占菌体总蛋白的32%;诱导表达产物主要以包涵体形式存在,6 His-NTA纯化后获得目的 蛋白,Western-Blot结果 显示纯化蛋白具有良好的抗原性.结论 成功表达和纯化了HMGB1基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张伟	第四军医大学微生物教研室	257	1157	14.0	19.0
2	张惠中	第四军医大学唐都医院检验科	196	724	13.0	17.0
3	任君萍	第四军医大学微生物教研室	18	51	5.0	6.0
4	顾炳权	第四军医大学唐都医院检验科	29	193	9.0	13.0
5	姜南艳	第四军医大学唐都医院检验科	11	50	4.0	6.0
6	沈建军	第四军医大学唐都医院检验科	40	228	7.0	13.0