结核分枝杆菌Ag85A在大肠埃希菌中的表达与纯化

• 作者: 仲人前 周晔 娄加陶 蒋天舒 谷明莉 邓安梅 陈波 陈燕
• 来源期刊: 现代检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 Ag85A抗原 表达纯化
• 年，卷（期）: 2008,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 16-18
• 页数: 3页
• 分类号: Q78|R378.911
• 字数: 2748字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7414.2008.01.005

摘要

目的 在大肠埃希菌中表达、纯化结核分枝杆菌Ag85A蛋白,探讨Ag85A蛋白作为候选疫苗用于结核免疫预防和治疗的可行性.方法 扩增人结核分枝杆菌Ag85A基因序列,将结核分枝杆菌Ag85A的全长cDNA插入到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建成Ag85A重组质粒.将重组质粒转入大肠埃希菌BL21并以IPTG诱导表达,经SDS-PAGE和Western-blot鉴定大肠埃希菌表达的重组蛋白.结果 成功克隆了结核分枝杆菌Ag85A,获得了pGEX4T-Ag85A重组子,Ag85A在大肠埃希菌中实现了稳定表达,表达的蛋白条带大小约32 kD,与预期结果 相符.结论 成功地对结核分枝杆菌免疫保护性抗原Ag85A进行了基因克隆与表达,为进一步研究其在结核病新型疫苗研制中的应用奠定了基础.