实时定量RT-PCR技术测定初治白血病患者常见融合基因转录子水平及其标准化的探讨

• 作者: 主鸿鹄 刘艳荣 常艳 李玲娣 李金兰 秦亚溱 郝乐 阮国瑞 陈珊珊 黄晓军
• 来源期刊: 中华血液学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 白血病 融合蛋白质类 逆转录聚合酶链反应,实时定量
• 年，卷（期）: 2007,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 433-437
• 页数: 5页
• 分类号: R73
• 字数: 4544字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0253-2727.2007.07.001

摘要

目的 了解白血病常见融合基因M-bcr-abl(表达产物为P210bcr-abl)、m-bcr-abl(表达产物为P190bcr-abl)、TEL-AML1、AML1-ETO、PML-RARα、CBFβ-MYH11在初治白血病患者中的表达水平.方法 采用基于TaqMan探针的实时定量RT-PCR(RQ-PCR)技术检测195例白血病患者骨髓细胞融合基因转录子水平,其中M-bcr-abl+慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)50例、M-bcr-abl+急性淋巴细胞白血病(ALL)10例、m-bcr-abl+ALL 19例、TEL-AML1+ALL 11例、AML1-ETO+急性髓系白血病(AML)30例、PML-RARα+急性早幼粒细胞白血病(APL)58例、CBFβ-MYH11+AML患者17例,并检测13例M-bcr-abl+CML-CP患者的外周血细胞融合基因转录子水平.以abl作为内参基因,融合基因转录子水平以融合基因转录子拷贝数/abl基因转录子拷贝数×100%表示.结果 CML-CP患者骨髓及外周血M-bcr-abl转录子水平相似(中位值分别为30%和35%,P＞0.05)、ALL患者M-bcr-abl及m-bcr-abl转录子水平相似(中位值分别为64%和54%,P＞0.05),ALL患者M-bcr-abl转录子水平明显高于CML-CP患者(P＜0.001).ALL患者TEL-AMLl转录子中位水平为228%.表达特异性融合基因的AML患者中,AMLl-ETO转录子水平明显高于CBFβ-MYH11及PML-RARα(中位值分别为388%,145%和47%,P值均＜0.001),CBFβ-MYH11转录子明显高于PML-RARα(P＜0.001).L型、V型及S型PML-RARα转录子中位水平分别为45%、44%及55%,L型明显低于S型(P=0.04).结论 不同类型融合基因转录子在初治白血病患者中的水平不同,并有个体差异.初治患者融合基因转录子水平的测定不仅为检测微量残留病、评价疗效提供基准值,而且是不同实验室间数据比较、实现标准化的基础.