发菜中超氧化物歧化酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 于晶 汪滢 王全喜 章秀 陈晓 陈李萍
• 来源期刊: 植物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 发菜 超氧化物岐化酶基因克隆 诱导表达 酶活测定
• 年，卷（期）: 2007,（3）
• 页码范围: 289-292
• 页数: 4页
• 分类号: Q94
• 字数: 3248字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5102.2007.03.008

摘要

采用基因工程技术从发菜总DNA中克隆了一段的基因序列,该序列与基因库中已公布的编码地木耳(Nostoc commnue)超氧化物歧化酶的氨基酸序列同源性为97%.将该基因插入含T7启动子质粒pET-32中构建表达质粒pET-sod,然后将该表达质粒转入大肠杆菌BL21中进行蛋白表达,表达菌株用1 mmol·L-1 IPTG诱导表达数小时后,产生较多的重组的蛋白,且该蛋白以可溶性蛋白形式存在.SDS-PAGE分析表明,在相对分子量约为22 kd的位置有一条明显蛋白质带.将诱导表达后的蛋白通过亲和层析的方法进行蛋白纯化;NBT光还原法测定表达产物的比活力,每毫克纯化蛋白约为2 550 U.对纯化后的蛋白进行高温胁迫研究,将该纯化蛋白在60℃高温下胁迫90 min后,其活性为原(未经胁迫)蛋白活性的85%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王全喜	上海师范大学生命与环境科学学院	221	1960	21.0	34.0
2	于晶	上海师范大学生命与环境科学学院	59	537	13.0	21.0
3	陈李萍	上海师范大学生命与环境科学学院	3	32	2.0	3.0
4	章秀	上海师范大学生命与环境科学学院	3	32	2.0	3.0
5	汪滢	上海师范大学生命与环境科学学院	2	29	1.0	2.0
6	陈晓	上海师范大学生命与环境科学学院	3	56	3.0	3.0