小鼠锰超氧化物歧化酶在大肠杆菌中的表达和纯化

• 作者: 王峰 黄璐圆
• 来源期刊: 华南农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 锰超氧化物歧化酶 表达 纯化 SOD活性
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 页码范围: 85-89
• 分类号: Q78
• 字数: 3257字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-411X.2010.03.021

摘要

为构建小鼠锰超氧化物歧化酶(SOD)的原核表达载体,在大肠杆菌中进行蛋白表达、纯化和功能检测,以小鼠肝脏cDNA为模板,利用PCR方法克隆小鼠锰SOD基因,PCR扩增了1个长600 bp左右的基因片段,该片段编码由198个氨基酸组成的成熟的小鼠锰SOD蛋白.将其插入pET15b载体中,经测序鉴定正确后,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta-gami.含有pET15b-mMn-SOD质粒的工程菌经过IPTG诱导能表达出相对分子质量约25000的目的蛋白,超声破碎菌体,经Ni-NTA纯化后得到纯度约为95%的重组mMn-SOD蛋白.SOD活性检测表明经过诱导表达的mMn-SOD比活力为531.7 U/mg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王峰	暨南大学药学院	33	133	7.0	10.0
5	黄璐圆	中国科学院广州生物医药与健康研究院分子医学中心	5	15	2.0	3.0