人LYVE-1的基因克隆及其在毕赤甲醇酵母细胞中的表达鉴定

• 作者: 吕元明 陶蕾 高锋
• 来源期刊: 检验医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 淋巴管内皮特异性透明质酸受体 毕赤甲醇酵母 基因表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2007,（4）
• 所属期刊栏目: 分子生物学检验论著
• 页码范围: 385-389
• 页数: 5页
• 分类号: Q503
• 字数: 3535字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2007.04.007

摘要

目的 获得可溶、稳定、与人淋巴管内皮特异性透明质酸受体(LYVE-1)具备相同抗原性的重组人LYVE-1,为进一步研究LYVE-1在淋巴管形成中的作用及临床肿瘤免疫学诊断打下基础、提供材料.方法 采用逆转录-酶链聚合反应(RT-PCR)自人淋巴结获得LYVE-1全长cDNA,将其克隆入真核表达载体pPICZα,构建含人LYVE-1的重组质粒(pPICZα-LYVE-1);经全自动序列分析仪测序确证后,将此重组质粒转化入毕赤甲醇酵母细胞(GS115)中进行诱导表达,表达产物经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析及免疫印迹试验(Western blot)鉴定.结果 经甲醇诱导的含pPICZα-LYVE-1的酵母细胞表达出重组人LYVE-1的融合蛋白,此蛋白在凝胶上表现为一约70 000的区带,在Western blot实验中可被LYVE-1的特异多克隆抗体识别.结论 人LYVE-1融合蛋白在酵母表达系统中高水平表达,并具有与人体天然蛋白相同的抗原活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高锋	上海交通大学附属第六人民医院中心实验室	70	588	13.0	21.0
2	吕元明	上海交通大学附属第六人民医院中心实验室	4	11	2.0	3.0
3	陶蕾	上海交通大学附属第六人民医院中心实验室	7	21	3.0	4.0