重组anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ非复制型逆转录病毒的构建

• 作者: 俞康 单大名 梁彬 沈志坚 胡永仙 谭映霞 钱红兰
• 来源期刊: 温州医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 单链抗体 逆转录病毒 PA 317细胞 基因表达 NIH 3T3细胞
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 433-435,439
• 页数: 4页
• 分类号: Q46
• 字数: 3328字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2138.2007.05.006

摘要

目的:构建pLNCX/anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ的重组真核表达载体,转染PA 317细胞株,包装制备重组非复制型逆转录病毒.方法:采用DNA重组技术把pBULLET上的CD28-ζcDNA插入到已含anti-CD20 scFv/CD80的真核逆转录病毒载体pLNCX质粒上,转染PA 317细胞株,经G418筛选,收获上清液获非复制型逆转录病毒,将病毒感染NIH 3T3细胞株,用PCR、流式细胞术检测目的基因在NIH 3T3细胞中的表达情况,确定病毒滴度.结果:经酶切及测序鉴定均证实pLNCX/anti-CD20scFv/CD80/CD28/ζ的成功构建;采用PCR方法能够从逆转录病毒感染的NIH 3T3细胞中扩增出一条与目的基因大小一致的DNA片段;流式细胞术检测显示该目的基因能够在NIH 3T3细胞中表达目的蛋白.结论:成功构建高滴度表达anti-CD20 scFv/CD80/CD28/ζ非复制型逆转录病毒,并能在NIH 3T3细胞中表达目的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	俞康	温州医学院第一附属医院血液内科	113	559	11.0	18.0
2	沈志坚	温州医学院第一附属医院血液内科	45	188	8.0	11.0
3	谭映霞	温州医学院第一附属医院肿瘤与移植免疫研究所	38	136	8.0	10.0
4	胡永仙	温州医学院第一附属医院血液内科	7	12	3.0	3.0
5	钱红兰	温州医学院第一附属医院血液内科	28	95	5.0	8.0
6	梁彬	温州医学院第一附属医院血液内科	21	49	4.0	5.0
7	单大名	美国华盛顿大学Bio-Rad实验室	1	0	0.0	0.0